Основний процес ПЛР виявлення нового коронавірусу
1. Збір зразків: одночасний забір зразків верхніх дихальних шляхів (включаючи носоглотку та ротоглотку) та нижніх дихальних шляхів (включаючи мокротиння, аспірат трахеї або рідину з бронхоальвеолярного лаважу) для виявлення nCoV за допомогою RT-PCR. Якщо зразки нижніх дихальних шляхів легко доступні: використовуйте відповідні ЗІЗ для збору зразків (зверніть увагу на зразки URT для захисту від крапель та впливу та зразки LRT для запобіжних заходів у повітрі) При відборі зразків URT використовуйте тампони для забору вірусів (стерильний поліестер або віскоза замість бавовни) і середовище транспортування вірусу. Не беріть проби з ніздрів або мигдалин. Для пацієнтів з підозрою на nCoV, особливо з пневмонією або важкими формами, один зразок URT не може виключити діагноз, тому рекомендується збільшити проби URT та LRT.
2. Екстракція нуклеїнової кислоти: інструмент для вилучення нуклеїнової кислоти або ручна екстракція нуклеїнової кислоти
1), немає потреби в інструментах, використовуйте ручне витягування
Обладнання та лабораторні витратні матеріали, необхідні для вилучення нуклеїнової кислоти та виділення зразків:
шафи біологічної безпеки (функції: поділ проб, забезпечення персоналом, пробами та охорона навколишнього середовища),
Настільна високошвидкісна охолоджувана центрифуга (функція: швидкість більше або дорівнює 12000 об/хв, аналіз нуклеїнових кислот тощо),
Низькотемпературний холодильник (функція: зберігання реагентів),
Металева ванна, піпетка (функція: точне дозування),
Стерилізовані центрифужні пробірки (функція: розділення нуклеїнових кислот тощо),
Латексні рукавички (функція: проти забруднення),
Абсолютна вода без етанолу, ізопропанола, ДНКази та РНКази (вода, не оброблена DEPC).
3. Автоматичний інструмент для вилучення нуклеїнової кислоти: (автоматична екстракція, 32 зразки можна витягти один раз за 26 хвилин)
Відповідна попередньо встановлена пластина завантажується та витягується безпосередньо на машині:
4. Флуоресцентне кількісне ПЛР виявлення:
Необхідне обладнання та витратні матеріали: шафа біологічної безпеки (функції: пробопідготовка, забезпечення персоналом, пробами та охорона навколишнього середовища),
Флуоресцентний кількісний інструмент ПЛР (функція: виявлення та аналіз ампліфікації ПЛР),
Настільна високошвидкісна охолоджувана центрифуга (функція: швидкість більше або дорівнює 12000 об/хв),
Низькотемпературна морозильна камера (зберігання зразків при -86 градусах, зберігання реагентів при -20 градусах і 4 градусах),
осцилятор, (мікс)
Градуйовані наконечники для піпеток (функція: точне завантаження), 1-10розмір ul
Стерилізовані центрифужні пробірки (0,5/1,5/2мл),
0.2 мл оптична пробірка/планшет для ПЛР (функція: реакційна пробірка для ПЛР),
Латексні рукавички (функція: проти забруднення).
Екстракція нуклеїнової кислоти, конфігурація реакційної системи та інтерпретація результатів регулюються інструкціями з набору.
